Aproximación a la determinación electroquímica del grado de metilación del ADN

Résumé

El conocimiento de las modificaciones epigenéticas es crucial para la detección y tratamiento de diferentes enfermedades. Los cambios en los patrones de metilación en el ADN podrían ser empleados como biomarcadores para estas dolencias. En este sentido, la mejora de los métodos analíticos para la determinación del grado de metilación del ADN es de vital importancia ya que puede permitir detectar estas enfermedades en los primeros estadios de desarrollo. Aunque ya existen técnicas para este propósito, éstas son laboriosas, largas, caras y no lo suficientemente reproducibles. Estos problemas podrían ser solventados mediante el uso de técnicas electroquímicas que además, podrían llegar a ser de uso rutinario en laboratorios de análisis clínicos. En esta Tesis Doctoral, mostraremos los resultados obtenidos mediante el uso de dos diferentes tipos de materiales electródicos, monocristales de oro [1, 2] y electrodos serigrafiados de materiales de carbono [3, 4] para la determinación del grado de metilación del ADN. Para el caso de las superficies de oro, el proceso estudiado ha sido la adsorción/desorción de diferentes moléculas de interés como bases nitrogenadas, nucleósidos, nucleótidos y polinucleótidos. Por otro lado, para los electrodos serigrafiados de materiales de carbono, el proceso evaluado es la oxidación de estas mismas moléculas. En ambos casos se consiguió diferenciar los aductos metilados de la citosina (5mC) y la guanina (7mG) y realizar rectas de calibrado para su determinación analítica.