Improvements in MALDI-Imaging Mass Spectrometry to analyze the lipidome in different tissues. A step forward to clinical application.

Resumen

A pesar de los grandes avances de la imagen por espectrometría de masas (IMS), esta técnica aún requiere superar algunas limitaciones antes de despegar como una tecnología potente para su uso en clínica. El objetivo de esta tesis es mejorar algunos aspectos involucrados en el flujo de trabajo MALDI-IMS y enfocar su implementación para resolver cuestiones biológicas relacionadas con la lipidómica. Así, en el Capítulo 4 implantaremos ciertas mejoras en la preparativa de la muestra, así como en el set up óptico del espectrómetro de masas utilizado. El Capítulo 5 presenta la caracterización de las diferencias en el perfil lipídico entre el riñón normal de ratón, un modelo de lesión renal aguda (AKI) y el riñón AKI tratado con ferrostatina (Fer-1). En el Capítulo 6 se muestra la primera caracterización de los diferentes segmentos de la nefrona humana mediante MALDI-IMS de lípidos combinado con protocolos de inmunofluorescencia. Una vez caracterizado el riñón normal murino y humano, en el Capítulo 7 se realizó una comparación de los perfiles lipídicos obtenidos de estas dos especies con el fin de evaluar la calidad del ratón como un buen modelo animal para enfermedades humanas. El Capítulo 8 se centra en el estudio del lipidoma del cáncer renal de células claras (ccRCC) mediante MALDI-IMS y uHPLC y, por último, en el Capítulo 9, se examinará el lipidoma del Glioblastoma además del efecto del agente quimioterapéutico temozolomide (TMZ) sobre tejido cerebral humano.