Tratamientos fotodinámicos aplicados a listeria monocytogenes, salmonella enterica y a cepas de escherichia coli multirresistentes a los antibióticos

  1. Gulías Borau, Òscar
Dirigida por:
  1. Montserrat Agut Bonsfills Director/a
  2. Santi Nonell Marrugat Director/a

Universidad de defensa: Universitat Ramon Llull

Fecha de defensa: 13 de julio de 2017

Tribunal:
  1. Lluís Comellas Riera Presidente/a
  2. Rubén Ruiz González Secretario/a
  3. Margarita Mora Giménez Vocal
  4. Maria Teresa Mora Ventura Vocal
  5. M. de los Angeles Calvo Torras Vocal

Tipo: Tesis

Teseo: 510385 DIALNET lock_openTDX editor

Resumen

En la presente tesis doctoral se ha estudiado la terapia fotodinámica antimicrobiana como método de eliminación alternativo de bacterias, orientado a un posible uso sobre superficies o materiales, así como para un uso terapéutico. El uso de la terapia fotodinámica antimicrobiana presenta diversas ventajas, como son la no generación de resistencias por su daño masivo multifocalizado y la capacidad de dirigir su efecto a la zona deseada mediante la iluminación con una luz inocua de la longitud e intensidad adecuada. En esta tesis se ha buscado utilizar terapia fotodinámica antimicrobiana para intentar eliminar especies bacterianas potencialmente patógenas: Salmonella enterica, Listeria monocytogenes y Escherichia coli; en este último caso, se ha estudiado también su efectividad en diferentes cepas con diferentes patrones de resistencia a antibióticos, creciendo en suspensión o formando biopelículas. Así mismo, se han buscado sinergias entre el tratamiento fotodinámico y el tratamiento con un antibiótico, el ácido nalidíxico. Los resultados han sido los siguientes: Se consiguieron calcular las dosis mínimas inhibitorias de fotosensibilizador (azul de metileno) que eliminaba por completo cultivos bacterianos de más de 108 UFC/mL tanto en un gram positivo (Listeria monocytogenes) como en un gram negativo (Escherichia coli), pero hizo falta cambiar el fotosensibilizador a un derivado (nuevo azul de metileno) más eficiente para alcanzar dosis bactericidas sobre Salmonella enterica. En estudios con Escherichia coli, se comprobó la eficiencia de la terapia fotodinámica para la eliminación de las cepas multiresistentes a antibióticos, tanto en crecimiento planctónico como en biopelícula. Como era de esperar por su naturaleza de estructura de resiliencia, las cepas creciendo en biopelícula precisaron de una mayor concentración de fotosensibilizador para alcanzar la dosis bactericida y con más variabilidad que sobre cultivos planctónicos. Finalmente, para algunas de las cepas de E. coli, se estudiaron combinaciones con diferentes concentraciones de azul de metileno y ácido nalidíxico para buscar un posible efecto sinérgico entre ellos, pero sólo se detectó tal efecto en una de las cepas multiresistentes de Escherichia coli, manteniéndose el efecto aditivo en las demás cepas estudiadas. Como conclusión, podemos afirmar que en los estudios que se describen en esta tesis, queda demostrado que la terapia fotodinámica antimicrobiana es una metodología efectiva para la eliminación de un amplio espectro de microorganismos, de forma rápida y segura, incluso con cepas muy resistentes a tratamientos antibacterianos convencionales o formando estructuras de resistencia que causan grandes problemas al crecer en superficies, como las biopelículas. Como información añadida, se ha comprobado la existencia de diferencias en la respuesta al tratamiento entre los diferentes tipos bacterianos, siendo las gram positivas más sensibles al tratamiento. Se han evidenciado diferencias en la respuesta al tratamiento entre diferentes especies, e incluso entre diferentes cepas de la misma especie, posiblemente debido a diferencias en la estructura celular o presencia de mecanismos como bombas de eflujo, que limita la efectividad del tratamiento. Por último, parece ser que la composición/estructuración de la biopelícula también ejerce un papel modulador en la respuesta al tratamiento fotodinámico.